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中文名稱：MTS細胞增殖與細胞毒性檢測試劑盒

英文名稱：MTS Cell Proliferation And Cytotoxicity Detection Kit

產品規格：500次
產品貨號：LZ-01X6321

發貨周期：1～3天

商品介紹：

實驗報告：

一、分離與培養：

    1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大(da)鼠(shu)心房(fang)組織，然后(hou)用(yong)PBS將(jiang)此組織塊清洗2次，最(zui)后(hou)將(jiang)組織剪成1mm3左右(you)大(da)小；

    2、往組織塊中加(jia)入4 mL酶消(xiao)化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件(jian)下消(xiao)化10min，之(zhi)后(hou)用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并(bing)收集上清，用含10% FBS培養基(ji)終止消(xiao)化后(hou)4℃放置；

    3、剩下(xia)的組織再加(jia)入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上(shang)述方法(fa)收集上(shang)清(qing)并終(zhong)止(zhi)消化后4℃放置，重復(fu)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

    4、用200目不(bu)銹鋼篩(shai)網過濾細(xi)胞消化液(ye)，1200r/min 離(li)心(xin)10min，棄去上清，沉淀細(xi)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培(pei)養基混懸(xuan)，接(jie)種于25cm2培(pei)養瓶(ping)，放置于37℃ ，5％CO2 培(pei)養箱中培(pei)養；

    5、差速貼壁1h后，吸出培(pei)(pei)養基，按實驗(yan)需要接種于6孔板中繼(ji)續培(pei)(pei)養；

二、免疫熒光鑒定：

    1、待心房(fang)肌細胞生長至80%融合時，棄去培(pei)養基(ji)，用溫育的PBS沖洗細胞2次(ci)(ci)，每(mei)次(ci)(ci)10min，然后用4%多聚(ju)甲(jia)醛在室溫條件下固(gu)定細胞15min；

    2、PBS沖洗細胞2次(ci)，每次(ci)10min，然后(hou)在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

    3、PBS沖洗細(xi)胞(bao)2次(ci)，每次(ci)10min，然后在室溫條(tiao)件(jian)下(xia)，用4% BSA封閉細(xi)胞(bao)30min；

    4、按(an)1: 100的比(bi)例稀釋α-actin一(yi)抗，然(ran)后將其(qi)放在4℃冰箱中孵育細(xi)胞過夜(ye)；

    5、PBS沖洗細胞3次，每(mei)次10min，按(an)1：150的比例稀釋(shi)抗α-actin的二(er)抗， 37℃條件下放置1h；

    6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

培養操作步驟：

1．用(yong)蓋片(pian)(pian)鑷將蓋玻片(pian)(pian)自75%乙(yi)醇中(zhong)取出，用(yong)無菌絲綢(chou)布擦拭(shi)干凈，不(bu)要用(yong)紗布； 

2．將蓋玻(bo)片(pian)輕輕放入6孔(kong)培(pei)(pei)養板(ban)（每孔(kong)一片(pian)）或培(pei)(pei)養皿(min)(min)中（每個(ge)平皿(min)(min)可(ke)放置2-3片(pian)）； 

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處(chu)照射2-3小時； 

4．將經過計數的細胞懸(xuan)浮液移入(ru)培(pei)養板(ban)中，使蓋玻片*浸(jin)在培(pei)養液中； 

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 

人(ren)Ⅲ型膠(jiao)原(Col Ⅲ)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)(he)    人(ren)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)(he)    ;96T/48T    

人(ren)(ren)Ⅲ型(xing)前膠原肽(PⅢNP)ELISA試(shi)劑盒    人(ren)(ren)ELISA試(shi)劑盒    96T/48T    

人(ren)Ⅳ型膠(jiao)原(yuan)(Col Ⅳ)ELISA試劑(ji)盒(he)    人(ren)ELISA試劑(ji)盒(he)    96T/48T    

人(ren)(ren)BH3結構域(yu)凋(diao)亡(wang)誘(you)導蛋白(Bid)ELISA試劑(ji)盒    人(ren)(ren)ELISA試劑(ji)盒    96T/48T    

人B細胞κ 輕肽(tai)基因增(zeng)強子(zi)核因子(zi)抑(yi)制(zhi)因子(zi)ε(Nfkbie)ELISA試(shi)劑盒      人ELISA試(shi)劑盒    96T/48T    

人B細(xi)胞分(fen)化因(yin)子(BCDF)ELISA試劑(ji)盒      人ELISA試劑(ji)盒    96T/48T    

人(ren)B細胞活(huo)化(hua)因(yin)子受(shou)體(BAFF-R)ELISA試劑盒      人(ren)ELISA試劑盒    96T/48T    

人B細胞連(lian)接蛋白(BLNK)ELISA試(shi)劑盒    人ELISA試(shi)劑盒    96T/48T    

人B細胞(bao)淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑(ji)盒    人ELISA試劑(ji)盒    96T/48T    

人B細胞淋巴瘤(liu)因子3(Bcl3)ELISA試(shi)劑(ji)盒    人ELISA試(shi)劑(ji)盒    96T/48T    

人(ren)B細胞生長因子(BCGF)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)      人(ren)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)    96T/48T    

人(ren)B細胞受體(BCR)ELISA試劑盒  ;  人(ren)ELISA試劑盒    96T/48T    

人(ren)B因子(BF)ELISA試(shi)劑(ji)(ji)盒(he)    人(ren)ELISA試(shi)劑(ji)(ji)盒(he)    96T/48T    

人C4結合蛋白(C4BP)ELISA試劑盒(he)    人ELISA試劑盒(he)    96T/48T    

人cAMP反應元件結(jie)合(he)蛋白(CREB)ELISA試劑(ji)盒    人ELISA試劑(ji)盒    96T/48T    

人CCAAT增(zeng)強子結(jie)合蛋白α(C/EBPα)ELISA試劑盒(he)    人ELISA試劑盒(he)    96T/48T    

人CCAAT增強子結合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA試劑(ji)盒    人ELISA試劑(ji)盒    96T/48T    

人CCAAT增(zeng)強子(zi)結合蛋白(bai)ε(C/EBPε)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T    

人CC趨化因(yin)子受體1(CCR1)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)    人ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)    96T/48T    

一步法TUNEL細胞凋(diao)亡檢測(ce)試劑盒(he)(紅色(se)熒光)    

TUNEL細胞凋(diao)亡檢測試劑盒(顯色法)    

Caspase 1 活性檢測試劑盒    

Caspase 2 活性(xing)檢(jian)測試劑(ji)盒(he)    

Caspase 3 活性檢測試劑盒    

Caspase 4 活性(xing)檢測試劑盒(he)    

Caspase 6 活性檢(jian)測試劑盒(he)    

Caspase 8 活性檢測試劑盒(he)    

Caspase 9 活(huo)性(xing)檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒    

Caspase抑制劑(Z-VAD-FMK)    

Caspase 3抑制(zhi)劑(Ac-DEVD-CHO)    

線粒體(ti)膜電位檢測試(shi)劑盒    

羅丹(dan)明123    

CFDA SE細(xi)胞增殖與示蹤檢測試(shi)劑盒    

細胞增(zeng)殖示蹤(zong)熒光探針(CFDA SE)    

Ad-GFP-LC3B    

Ad-mCherry-GFP-LC3B    

DAPI溶液(5mg/ml)    

DAPI染色液(ye)    

Hoechst 33258細(xi)胞(bao)藍色熒光染料    

MTS細胞增殖與細胞毒性檢測試劑盒Hoechst 33258染色液    

Hoechst 33342細胞藍色(se)熒光染料    

Hoechst 33342染(ran)色液    

活細胞染色液(Hoechst 33342)(100×)    

注意事項：

1、本試劑盒僅供科(ke)學研究使用，不可(ke)用于(yu)診斷(duan)或治療。

2、螺(luo)旋蓋(gai)微量試(shi)劑(ji)管(guan)裝的試(shi)劑(ji)在開(kai)蓋(gai)前請(qing)短(duan)暫(zan)離心，將蓋(gai)和管(guan)內壁上的液體離心至(zhi)管(guan)底，避(bi)免開(kai)蓋(gai)時試(shi)劑(ji)損(sun)失。

3、禁止與其他品牌的試(shi)劑混用(yong)，否則會影(ying)響使用(yong)效果。

4、樣品或試劑被細(xi)菌或真菌污(wu)染或試劑交(jiao)叉(cha)污(wu)染可(ke)能會導致錯誤(wu)的結(jie)果。

5、最好使(shi)用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器(qi)皿，可重(zhong)復使(shi)用的玻璃器(qi)皿必須在(zai)使(shi)用前清(qing)洗并*清(qing)除殘留清(qing)潔劑(ji)。

6、避免皮膚或粘膜與試劑(ji)接觸(chu)。

7、需(xu)長時間保存(cun)可-20℃避(bi)(bi)光保存(cun)。避(bi)(bi)免反復凍(dong)融(rong)，否則將(jiang)會增(zeng)加(jia)空白吸收，從而影響(xiang)檢(jian)測結果。最好小劑量分裝，用避(bi)(bi)光袋(dai)或是黑紙、錫箔紙包住(zhu)避(bi)(bi)光。

8、用(yong)培養基或 PBS 來配(pei)制待(dai)檢(jian)測藥(yao)物。如(ru)果待(dai)測藥(yao)物有(you)還原性，則測定(ding)不含(han)細(xi)(xi)胞，僅含(han)有(you) MTS 的(de)待(dai)測藥(yao)物溶液在 490 nm處的(de)空白吸光(guang)度。如(ru)果該吸光(guang)度很小，則可以直接加入 MTS ，如(ru)果吸光(guang)度相(xiang)對較大(da)，則需要除去培養基，并用(yong)新鮮培養基洗滌(di)細(xi)(xi)胞兩(liang)次，然后加入新的(de) 100 μl 培養基和 10 μl MTS 進(jin)行檢(jian)測。

9、細(xi)胞處理(li)需要(yao)小心(xin)操作(zuo),盡量避免(mian)人為的損傷細(xi)胞。

10、加 MTS 溶液后(hou)孵育時間(jian)的長短根據細胞的類(lei)型和細胞的密度等實驗情(qing)況(kuang)而定，對于(yu)大多數情(qing)況(kuang)孵育 1 小時即可，白細胞需要培養(yang)較長時間(jian)。

11、如果(guo)不是使用(yong) 96 孔板檢測，MTS 溶液的用(yong)量相應等比例增加即可。